原子吸收光谱法测定人体血清中微量元素钙、镁、铜、铁、锌

1、 仪器介绍

AA-1800型原子吸收光谱仪是由行业的专家和国内知名高校联手研发完成，拥有几十年光谱仪器的研发和应用经验。该产品包括火焰、石墨炉及氢化物发生系统，可配置多种附件，灵活的配置方案可满足不同层次客户的需求。全自动多功能AA-1800型原子吸收光谱仪可进行复杂的样品分析，多种分析方法可自动切换，做到无人全自动分析。
AA-1800型原子吸收光谱仪广泛应用于科研、质检、疾控、环保、冶金、农林、化工等行业，创新的软、硬件设计确保样品分析的准确性、安全性、易用性，仪器维护简单便捷。

2、实验部分

2.1 仪器和试剂

2.1.1 仪器

MACY原子吸收光谱仪：AA-1800H

Transferpette微量移液管

SIGMA离心机：3-15

2.1.2 试剂及其配制

Cu、Fe、Zn标准溶液为1000 mg/L（国家标准物质中心），用时稀释至10 mg/L备用。

Ca、Mg标准溶液为1000 mg/L（国家标准物质中心），用时稀释至100 mg/L备用。

曲拉通：北京全新拓达科技有限公司，Triton X-100；

硝酸：北京化工厂，优级纯GR；

盐酸：北京化工厂，优级纯GR；

氯化钠：北京化工厂，分析纯AR ；

氧化镧：国药集团化学试剂有限公司，高纯试剂；

曲拉通与硝酸混合液：取曲拉通47 mL，加硝酸10 mL，用超纯水定容至1 L，用时稀释10倍后备用。

镧盐与氯化钠混合液：取氧化镧287 g加100 mL超纯水，436 mL盐酸，30 g氯化钠，最后用纯水定容至3 L，用时稀释4倍后备用。

2.2  实验步骤

2.2.1  样品的预处理

取事先存放在冰箱中保存的全血样品，上离心机离心2 min，然后用微量取样器分取500 µL血清于5 mL已经烘干的干净小塑料管中，加入2 mL稀释后的曲拉通与硝酸的混合液，摇匀备用，此试样用于血清中Cu、Fe、Zn的测定。再分取100µL血清于5 mL已经烘干的干净小塑料管中，加入2 mL稀释后的镧盐与氯化钠的混合液，摇匀备用，此液用于Ca、Mg血清中的测定。

2.2.2标准曲线的测定

取Cu、Fe、Zn标准使用液10 mg/L（此使用液三种元素可以配在一起），分别吸取1.0 、2.0 、3.0 、4.0 、5.0mL于100mL容量瓶中，用稀释后的曲拉通和硝酸混合液稀释至刻度，此标准溶液曲线分别为0.10 、0.20 、0.30 、0.40 、0.50 mg/L，摇匀备用。

取Ca标准使用液100 mg/L，分别吸取2.0 、4.0 、6.0 、8.0 、10.0 mL于100mL容量瓶中，用稀释后的镧盐和氯化钠混合液稀释至刻度，此标准溶液曲线分别为2.0 、4.0 、6.0 、8.0 、10.0 mg/L，摇匀备用。和Ca的标准曲线配制一样，配成Mg的标准曲线为0.5 、1.0 、1.5 、2.0 、2.5 mg/L，摇匀备用。

3、结论

血清中微量元素的正常值范围（单位：mg/L）

Ca----0.90～2.00

Zn----0.90～2.00

Fe----0.90～3.00

Ca----95.0～115.0

Mg----21.0～25.0

    其中，注意如果血清溶血则铁元素含量大于3.00 mg/L，这时候测定的铁元素的数值就不准确了，需取样品重新测定。

加标回收率

元素    测定值mg/L（为样品稀释后数值）    加标量mg/L     加标测定值mg/L     回收率%

Zn         0.19                                                  0.20                       0.38         95.0

Cu         0.29                                                  0.20                       0.48         95.0

Fe         0.30                                                   0.20                      0.49         95.0

Ca         4.9                                                     1.0                        5.9          100.0

Mg         1.0                                                      1.0                       2.0         100.0

试验方法

1、溶液配制

1.1 曲拉通与硝酸混合液：取曲拉通30 mL，加硝酸10 mL，用超纯水定容至1 L，用时稀释10倍后备用。

1.2 镧盐与氯化钠混合液：取氧化镧58.65 g加50 mL超纯水，250 mL浓盐酸（产生大量热，此步骤一定要慢），最后用纯水定容至1L，备用。

1.3 Cu、Fe、Zn标准使用液10 mg/L（此使用液三种元素可以配在一起）：分别移取1000 mg/L标准溶液各1 mL于100 mL容量瓶中，配制成10 mg/L标准使用液，摇匀备用。

1.4 Ca、Mg标准使用液（混合）

Ca标准使用液10 mg/L：移取1000 mg/L Ca标准溶液0.25 mL于25 mL容量瓶中，配制成10 mg/L标准使用液，摇匀备用。

Mg的标准使用液5 mg/L：移取1000 mg/L Mg标准溶液0.125 mL于25 mL容量瓶中，配制成5 mg/L标准使用液，摇匀备用。

2、  实验步骤

2.1  样品的预处理

取2.5 mL血清于15 mL已经烘干的干净小塑料管中，加入10 mL稀释后的曲拉通与硝酸的混合液，摇匀备用，此试样用于血清中Cu、Fe、Zn的测定。再分取100 µL血清于15 mL已经烘干的干净小塑料管中，加入10 mL稀释后的镧盐与氯化钠的混合液，摇匀备用，此液用于Ca、Mg血清中的测定。

2.2标准曲线的测定

取Cu、Fe、Zn标准使用液10 mg/L，分别吸取0.25 、0.50 、0.75 、1.0 、1.25 mL于25 mL容量瓶中，用稀释后的曲拉通和硝酸混合液稀释至刻度，此标准溶液曲线分别为0.10 、0.20 、0.30 、0.40 、0.50 mg/L，摇匀备用。

取Ca标准使用液10 mg/L，分别吸取0.5 、1.0 、2.0 、3.0 、4.0  mL于10mL容量瓶中，用稀释后的镧盐和氯化钠混合液稀释至刻度，此标准溶液曲线分别为0.5 、1.0 、2.0 、3.0 、4.0 mg/L，摇匀备用。取Mg的标准使用液5 mg/L，分别吸取0.1 、0.2 、0.4 、0.6 、0.8 mL于10 mL容量瓶中，用稀释后的镧盐和氯化钠混合液稀释至刻度，此标准溶液曲线分别为配成Mg的标准曲线为0.05 、0.10 、0.20 、0.30 、0.40 mg/L，摇匀备用。

2.3进样

3、结果计算

血清中微量元素的正常值范围（单位：mg/L）

Cu----0.90～2.00

Zn----0.90～2.00

Fe----0.90～3.00

Ca----95.0～115.0

Mg----21.0～25.0

加标回收率

元素    测定值mg/L（为样品稀释后数值）    加标量mg/L     加标测定值mg/L     回收率%

Zn         0.19                    0.20          0.38         95.0

Cu         0.29                    0.20          0.48         95.0

Fe         0.30                    0.20          0.49         95.0

Ca         4.9                     1.0           5.9          100.0

Mg         1.0                     1.0           2.0         100.0