总辣椒碱含量的测定——分光光度法

1.范围

适用于辣椒及其油树脂中总辣椒碱含量的紫外分光光度测定。

2.引用

ISO 948香辛料和调味品取样方法

ISO 2825香辛料和调味品 分析用粉末试样的制备

3.原理

在波长248nm和296nm处测定辣椒萃取物或辣椒油树脂的甲醇溶液的紫外吸收,根据吸收值计算样品中总辣椒碱的含量。

4.试剂

活性炭，甲醇：光谱纯，甲醇溶液（7+3），盐酸溶液：1mol/L，氢氧化钠溶液：1mol/L，四氢呋喃。

5.仪器

单科线容量瓶：25mL,100mL,250mL.，紫外分光光度计，磁力搅拌器，膜过滤器，索氏提取器，旋转真空蒸发器，水浴，样品筛5.9分析天平。

6.取样

实验室样品应具有代表性，详细参考

7.试样制备

7.1辣椒粉

7.1.1粉状样品应全部过500μm孔径的分样筛,否则按ISO2825的规定,将其研碎至粒度符合要求,然后混匀。

7.1.2称取约10g混匀的粉状样品(7.1.1),精确至0.01g,定量移入索氏提取器中。

7.1.3用100ml四氢呋喃萃取8h。然后用250ml圆底烧瓶和旋转真空蒸发器在水浴上,减压除去尽可能多的溶剂。

7.22整辣椒

7.2.1按 ISO2825的规定,将整辣椒磨碎,并全部通过500μm孔径的分样筛,混匀。

7.2.2称取约10g混匀的磨碎样品，精确至0.01g，定量移入索氏提取器中。

7.2.3用100ml四氢呋喃萃取8h，随后将萃取液转移至250ml圆底烧瓶中，在旋转真空蒸发器上利用水浴减压浓缩，尽可能完全除去溶剂。

7.3辣椒油树脂 

7.3.1 将辣椒油树脂完全混匀。

7.3.2称取 0.5 g~1g混匀的辣椒油树脂(7.3.1),精确至0.0001g,移人250mL容量瓶中。

8.分析步骤

8.1试样测定液的制备

8.1.1整辣椒和辣椒粉

在7.1.3或7.2.3得到的萃取物中加人0.058~0.1g活性炭,活性炭与萃取物的比例为1:10,然后加入约 90 mL 甲醇溶液,磁力搅拌30min,放置5min后,通过膜过滤器滤入100 mL 容量瓶中,用甲醇溶液(4.3)稀至刻度,滤液应清澈(略显淡黄色不影响测定)。

8.1.2辣椒油树脂

于试样(7.3.2)中加人0.05g~0.1g活性炭,活性炭与油树脂的比例为1:10,然后加入约90ml甲醇溶液,磁力搅拌30min,放置5min后,通过膜过滤器滤人100mL容量瓶中,用甲醇溶液稀至刻度,滤液应清澈(略显淡黄色不影响测定)。

8.2光度测定用稀释液的制备

8.2.1 将3m水、2mL盐酸加入25mL,容量瓶中,用甲醇稀至刻度,此溶液标记为“空白酸液 A”。

8.2.2 将3mL水、2ml氢氧化钠溶液加入25mL容量瓶中,用甲醇稀至刻度,此溶液标记为“空白碱液 B”。

8.2.3取3个25mL容量瓶,分别标记为a1、a2、a3,均加人1mL滤液(8.1.1或8.1.2)、2.7mL水和2mL盐酸,用甲醇稀至刻度。

8.2.4另取3个25mL容量瓶,分别标记为b1、b2、b3,均加入1mL滤液(8.1.1或8.1.2)、2.7mL水和2mL氢氧化钠,用甲醇稀至刻度。

8.3分光光度测定

8.3.1双光束分光光度计

用甲醇溶液调零点和100%透过率。以空白酸液A为参比,在248nm和296nm处测定空白碱液B的吸收。然后在248nm和296nm处分别以a1、a2、a3为参比,对应测定b1、b2、b3溶液的吸收值。

8.3.2单光束分光光度计

用甲醇溶液调零点和100%透过率。将空白碱液B放入测量池后重调零点,然后分别在248nm和296nm处测定a1、a2、a3的吸收值;再将空白酸液A放入测量池重调零点,然后分别在248nm和296nm处测定b1、b2、b3的吸收值。

9.计算

9.1在248nm处，总辣椒碱含量的质量分数，按式计算

9.2在296nm处，总辣椒碱含量的质量分数，按式计算

9.3在248nm和296nm处测得的总辣椒含量的差不得大于10%，否则重测。

方法来源：GB/T 30389-2013